ELISA試劑盒檢測(cè)的精度
我們?cè)趯?shí)驗(yàn)過(guò)程做了總結(jié)，逐步完善，也就是學(xué)習(xí)，分享學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)。以下總結(jié)實(shí)驗(yàn)和解決共同的問(wèn)題，與你分享
1，原是非常重要的，我做的重組蛋白，他嚴(yán)厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì)，生物素和脂類(lèi)或小分子，我們的裝修之前涂，我簡(jiǎn)要如下： 2460親和素-生物素抗生物素蛋白涂層：*載體，加入生物素標(biāo)記的，這種鍍膜的方法均勻，牢固，ELISA檢測(cè)試劑盒已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原定量測(cè)定。脂質(zhì)：可以在有機(jī)溶劑（如酒精）孔加入溶解后，打開(kāi)冰箱隔夜或冷干，待酒精揮發(fā)，在固體表面上進(jìn)行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
2，關(guān)閉：以下包之后是無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高，涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。ELISA試劑盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明膠牛血清；ELISA檢測(cè)試劑盒脫脂奶粉，價(jià)格相對(duì)低廉，可用于高濃度（5%～10%）；和一些罕見(jiàn)的使用各種動(dòng)物血清（主要是為了消除類(lèi)似的蛋白和酪蛋白等干擾）。但到底選擇什么，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)踐。
3，包衣液的選擇，碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時(shí)因?yàn)闇y(cè)試需求，數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應(yīng)注意以下原則：蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合，取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu)，物理吸附是非特異性的，蛋白分子量，等電點(diǎn)，大集中，小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團(tuán)越多，所以更容易吸附在固相載體表面。測(cè)試也有很強(qiáng)的理論于實(shí)踐，看zui后一個(gè)可以應(yīng)用到我們的測(cè)試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液，和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
4，洗板：可以說(shuō)，在中操作，清洗是在主要的關(guān)鍵技術(shù)。由于聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍存在的，為了實(shí)現(xiàn)自由酶與客觀(guān)相結(jié)合的標(biāo)記的分離，在板料孔中殘留游離和吸附的非特異性干擾物質(zhì)的去除，洗滌，并應(yīng)將干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)的非特異性吸附。所以在洗衣板會(huì)有一定的誤差，非常人的因素（當(dāng)然也有洗衣機(jī)除條件），ELISA檢測(cè)試劑盒是不完整的或弦清孔，系統(tǒng)的影響是如此敏感，但不小。
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