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HGC-27細(xì)胞,人未分化胃癌細(xì)胞操作步驟
更新時(shí)間:2024-10-31   點(diǎn)擊次數(shù):101次

     在繼續(xù)探討HGC-27細(xì)胞,即人未分化胃癌細(xì)胞的操作步驟時(shí),我們需細(xì)致入微地確保每一步的精確性和無(wú)菌操作的重要性。


    首先,進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),需快速將凍存的HGC-27細(xì)胞從液氮中取出,并迅速置于37℃水浴中輕輕搖晃,確保細(xì)胞在1分鐘內(nèi)融化。隨后,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至預(yù)裝有培養(yǎng)基的離心管中,輕柔混勻后離心,去除上清液,再加入新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,接種至培養(yǎng)瓶中,置于37℃、5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。


   細(xì)胞傳代時(shí),待細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%融合度,棄去舊培養(yǎng)基,用PBS清洗兩次后,加入適量胰酶消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、間隙增大時(shí),加入培養(yǎng)基終止消化,吹打制成細(xì)胞懸液,按一定比例分至新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。


    此外,細(xì)胞凍存也至關(guān)重要。選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,按上述方法消化、離心后,用細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞密度至適宜范圍,分裝至凍存管中,標(biāo)記好細(xì)胞名稱、凍存日期等信息后,按梯度降溫法逐步冷凍,最終置于液氮中長(zhǎng)期保存。


    在整個(gè)操作過(guò)程中,嚴(yán)格的無(wú)菌操作、精準(zhǔn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)以及適時(shí)的培養(yǎng)基更換,都是確保HGC-27細(xì)胞健康生長(zhǎng)和實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。


 

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